反硝化细菌测试瓶库号：M78422

反硝化细菌测试瓶NRB 500个一箱

在科研和实际工作中，传统的石油烃降解菌等微生物的测定方法繁琐、费时、工作效率低且不准确。

本产品操作简单、使用方便、检测数据准确、是开展微生物采油研究、监测及菌种产品-质量检验的测试工具。此外，根据用户需要还可提供其他系列细-菌测试瓶。这些测试瓶包括：(1)稠油降粘菌测试瓶；(2)铁细-菌测试瓶；(3)腐生菌（异养菌）测试瓶；(4)硫（化）细-菌测试菌；(5).产甲烷菌测试瓶；(6)发酵菌测试瓶；(7)产乙酸盐菌测试瓶；(8)产表面活性剂菌测试瓶；(9).糖蜜菌测试瓶；(10)产聚合物菌测试瓶；(11)反硝化菌测试瓶；(12)真-菌测试瓶；(13)酵母菌测试瓶；（14）产H2产乙酸菌测试瓶。这些测试瓶可用于油田污水注水、微生物采油、钻井液、完井液、压裂液、修井液及工业循-环冷却水中微生物的快速测定。

一、测试原理

本测定采用绝迹稀释法，即欲测定的水样用注射器逐级注入到测试瓶中进行稀释，直到后一个测试瓶无菌生长为止，然后根据稀释的倍数计算出水样中细-菌的数目。

二、测试方法

1.根据水样中菌量的大致多少，将数个测试瓶排成一组，并依次编上序号。

2.用注射器把0.5毫升水样注入1号瓶内，充分振荡。

3.用新的注射器从1号瓶内取0.5毫升液体注入到2号瓶内，充分振荡。

4.再用新的注射器从2号瓶中取0.5毫升液体到3号瓶中，充分振荡。

5.重-复上述操作程序，一直稀释到后一瓶为止。

三、培养方法及细-菌生长的鉴别

把上述经稀释后的测试瓶放在30℃（或现场水温）培养箱内培养。按下表中列出的培养时间及生长指示进行计数。

四、注意事项

1.测试瓶应放在阴凉干燥处，本产品可保存一年。一年后测试瓶无异常现象，仍可继续使用。

2.石油烃降解菌测试瓶中有少量沉淀，不影响测试结果。

3.注射器要经过高压蒸气消-毒，每稀释一次，要重新换一支。

4.由于1号测试瓶中所取原水样为0.5毫升，因此在计算细-菌数时应将查表结果乘以2，才是1毫升的细-菌数量；若在1号瓶中所取水样为1毫升，则可直接计数（不需乘2）。

5.测试瓶的铝皮盖很薄很软，使用时可用注射器针直接刺入进行接种或取样，操作方便，不需揭开铝皮盖。

表：各种测试瓶外观、培养时间及生长指示一览表

序号 细-菌外观 培养时间（天） 生长指示

1石油烃降解菌 培养液呈红色，且上层有油状物 7培养液由红变黄并浑浊

2铁细-菌 培养液呈棕色 14 培养液出现沉淀，并伴有上层变清

3稠油降粘菌 培养液上层有稠油 7 稠油分散乳化、轻摇后培养液变黑

4腐生菌(异养菌) 培养液呈红色 5 培养液由红变黄，并浑浊

5硫（化）细-菌 培养液无色透明 14 用1%BaCl2溶液滴加3-5滴，培养液中出现BaSO4白色浑浊或沉淀

6产甲烷菌 培养液无色透明 14-28 有气泡产生，用气相色谱检测CH4的存在

7发酵菌 培养液呈红色 5 培养液由红变黄

8产乙酸盐菌 培养液呈红色 7 培养液由红变黄

9产表面活性剂菌 培养液上层有原油 7 培养液中原油分散乳化、轻摇后培养液变黑

10糖蜜菌 培养液呈红色 5 培养液由红变黄

11产聚合物菌 培养液上层有原油 14 培养液变稠变粘

12反硝化菌 培养液无色透明 7 浑浊，产生气泡，或用格里斯试剂*检测呈阳性反应

13真-菌 培养液浅黄色透明 5 培养液变浑变浊，或出现明显沉淀，或培养液表层出现明显菌膜

14酵母菌 培养液呈浅褐色 5 培养液出现浑浊、形成表面菌膜或产生沉淀

15产H2产乙酸菌 培养液呈红色且上层有油状物 14 培养液由红变黄，并有小气泡产生

*格里斯试剂由A液和B液组成，A液为双氨基苯磺酸溶液；B液为α-萘胺溶液。取经培养后的反硝化细-菌培养液加于白瓷比色板上，滴加格里斯试剂，如显红色，证明有反硝化细-菌生长。（A液的配制：溶解0.6g对氨基苯磺酸于70ml沸蒸馏水中，冷却后加入20ml浓盐酸，然后稀释成100ml，贮于棕色瓶中保存于冷处备用；B液的配制：溶解0.6gα-萘胺于1ml浓盐酸的蒸馏水中，然后稀释至100ml，贮于棕色瓶中，保存于冷处备用。）

五、计数

可根据下列表进行计数：

出现细-菌生长的测试瓶 菌量（个/ml）

1 1-10

2 10-100

3 100-1000

4 1000-10000

若要准确地测定出细-菌数量，可采取二、三、四、五管平行管测定方法，并根据生长指标查表（分别查二、三、四、五次重复测数统计表）即可得到准确细-菌数量。

注：参考图片 以实物为主 试剂瓶每箱数量大小一样，不同试剂颜色会有不同

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